HCG 是怀孕的重要标志物,由早期囊胚分泌。因此,如能定量检测胚胎培养基中怀孕相关的生物标志物如 HCG 等,则能大大辅助无创胚胎选择,提高移植成功率。但目前的技术性壁垒,是胚胎上清的怀孕标志物含量过低,低至常规检测手段的灵敏度下限。
为了确定胚胎培养基中HCG的检测限,证明超灵敏 Simoa 平台可以用来检测胚胎培养基中的 HCG 水平,并研究 HCG 水平与胚胎生存能力之间的关系,美国波士顿 Beth Israel Deaconess 医疗中心和试管婴儿中心的科研人员联合 Quanterix 公司,将最新最灵敏的单分子级 simoa 技术用于检测植入前配体培养基中的 HCG 水平,发现移植成功的囊胚培养基中的 HCG 水平较高。
研究方法
这是一项胚胎培养基的回顾性队列研究,检测两种胚胎培养基:(1)Continuous Single Culture(CSC),Irvine,含血清蛋白补充剂(serum protein supplement,SPS),Origio;(2)Embryoglue(EG), Vitrolife。从转移或冷冻的囊胚中获取培养基。所有样品都经过鉴定。使用 Quanterix 开发的超灵敏 Simoa 平台对培养基中的 HCG 水平(pg/ml)进行检测,并与编码数据库进行匹配,以确定临床妊娠(fetal heart beat: FHB)是否源于移植胚胎。
研究结果
进行了两组分析
第一组:CSC+10%SPS 培养基,胚胎在该培养基中生长5天,结果显示植入和非植入胚胎的 HCG 无差别,因为 SPS 中的 HCG 水平较高。
第二组:EG+重组白蛋白培养基(无血清),移植前胚胎在该培养基中生长2-5小时,EG 培养基空白对照显示不含 HCG,2个阳性 FHB 和2个阴性样本之间的 HCG 水平有显着差异。为模拟人体胚胎队列,对10个 EG 培养基和样品进行盲测(5个阳性 FHB 和5个阴性),并检测2个空白对照。基于 Simoa 检测的 HCG 浓度进行排序,前4个胚胎中检测出3个阳性。
检测结果在很大程度上与胚胎在培养基中培养的时间相关,另外需要用干净的不会掩盖原始信号的培养基补充剂。研究结果表明,超灵敏 Simoa 平台,可以作为胚胎选择的重要辅助手段。(生物谷Bioon.com)
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