法国 cell-confiner
背景:
1、细胞几何学
越来越多的研究表明,除生化信号外,细胞与细胞之间及细胞与其微环境之间通过力信号进行交流。
细胞微环境的几何与力学性能对细胞的形态与功能影响巨大。许多生理过程,包括细胞黏附、细胞骨架ji性、细胞增生、
细胞分化、胚胎形成与发育、癌症转移、伤口愈合等受细胞与它们微环境之间物理力传输与敏感的显著影响。
2、细胞体积
细胞体积在细胞增殖、迁移、死亡等过程中的重要作用引起人们的日益关注
读数
电池体积,离子泵
标准培养限制
有几种生理和病理过程,其中细胞经历体积变化。然而,没有可靠的方法可用于实时准确测量贴壁细胞的体积。
细胞体积测定的you势
细胞在光学透明的腔室中培养,该腔室能够随时间准确确定它们的体积,并并行跟踪导致体积变化的生化过程,例如离子泵的激活。
例子
从间期到 Raji 细胞有丝分裂的体积跟踪 [2]。
(A) 细胞被放置在由柱子设置的校准高度的聚(二甲基硅氧烷)室中,在补充有 FITC-Dextran 的介质中。底部图片:细胞在落射荧光图像上排除荧光(比例尺 20 mm)。
(B) 对应于 (A) 中虚线的荧光剖面:荧光强度的zui大值和zui小值分别对应于腔室zui大高度(背景)和零高度(支柱)。右图:这些值用于校准信号和计算细胞的光学厚度。
(C) zui后,通过对细胞面积上的总荧光强度进行积分来获得细胞体积。
细胞限制(cell confiner)介绍
细胞限制器复制了细胞在体内通常受到的条件:它们被限制。它允许您控制细胞的厚度和细胞培养物的体积。
通过一种非破坏性的方法,你可以精雀地定义培养物的体积和施加在细胞上的特定压力。
这构成了一个新的和相关的系统来培养触发仿生学的细胞。
两个平行表面之间的控制细胞
技术
细胞 在两个平行表面之间被均匀地限制/压缩到具有亚微米分辨率的定义的微米高度。
提供不同的限制高度(例如 1 ?m – 300 ?m)
允许进行长期细胞培养和细胞增殖,同时保持对限制的完美控制
与高分辨率光学显微镜系统兼容
可以处理足够多的细胞以允许进行quan基因表达分析
可与生物功能化微结构基板和/或不同基质(几何控制)结合
可与凝胶结合使用(刚度控制)
兼容的 35 毫米培养皿和 6 孔板
可按需定制设计,请联系我们(电话:010-67529703)
应用程序
细胞迁移 2.5D、非粘附细胞的迁移和相互作用、细胞挤压、扁平细胞成像(细胞器在 2D 中对齐)、超分辨率视频显微镜(细胞器移动较少)、收缩性测定等
HeLa 细胞:不受限制,5 ?m,3 ?m。
细胞核束缚和层流破裂受细胞限制程度的调节
细胞迁移表型行为受限制高度和粘附程度的影响
细胞响应限制高度而经历表型转变
PUBLICATIONS
- A flagellate-to-amoeboid switch in the closest living relatives of animals Brunet. T., et al., Elife, 2021 Jan 15;10:e61037
- The nucleus measures shape changes for cellular proprioception to control dynamic cell behaviorVenturini. V., et al., Science, 2020, 370, eaba2644
- Confinement and Low Adhesion Induce Fast Amoeboid Migration of Slow Mesenchymal CellsY.-J. Liu, M. Piel., et al., Cell, 2015 160(4), 659-672
- Actin flows induce a universal coupling between cell speed and cell persistenceP. Maiuri, R. Voituriez, et al., Cell, 2015 161(2), 374–386
- Geometric friction directs cell migrationM. Le Berre, M. Piel, et al., Physical Review Letter 2013 111, 198101
- Mitotic rounding alters cell geometry to ensure efficient spindle assemblyO. M. Lancaster, B. Baum, et al., Developmental Cell, 2013 25(3), 270-283
- Fine Control of Nuclear Confinement Identifies a Threshold Deformation leading to Lamina Rupture and Induction of Specific GenesM. Le Berre, J. Aubertin, M. Piel, Integrative Biology, 2012 4 (11), 1406-1414
- Exploring the Function of Cell Shape and Size during MitosisC. Cadart, H. K. Matthews, et al., Developmental Cell, 2014 29(2), 159-169
- Methods for Two-Dimensional Cell ConfinementM. Le Berre, M. Piel, et al., 2014, Micropatterning in Cell Biology Part C, Methods in cell biology, 121, 213-29