世联博研北京公司细胞、组织收缩特性(2D/3D收缩特性))测试方案:
背景：
在许多器官和组织中,细胞收缩力在生理学和病理生理学中起着核心作用。因此,调节细胞收缩力通常是主要的治疗策略。常见的例子有用于心肌细胞的强心剂、用于气道平滑肌细胞的支气管扩张剂、用于血管平滑肌细胞的血管扩张剂、和用于骨骼肌细胞的松弛剂。细胞收缩力在转移和癌细胞侵袭中也很重要。在每一种情况下,显然都存在未满足的紧急治疗需求。然而,在高通量药物发现中,使用细胞收缩力本身的测量作为主要读数以前并不实用。相反,目前可用的高通量筛选技术仅限于测量收缩本身的替代物,包括细胞内信使等上游效应物、针对特定细胞表面受体或其他部分的结合亲和力测定、蛋白质表达和蛋白质重新定位或形态学变化。
为此，世联博研北京公司代理销售国际前沿的细胞、组织、外基质、2D/3D等各种收缩特性测试定装置：我们的平台兼容单细胞、融合单层细胞以及介于两者之间的细胞。可以按需定制的,包括孔格式、模量、珠荧光、玻璃厚度的定制。我们可以提供任何组合
一、细胞收缩力高通量检测多孔板-24、96、384孔板:
图1:原理图:
1.1)细胞收缩力测试24孔板
1.2)细胞收缩力测试96孔板
1.3)细胞收缩力测试384孔板
该可高通量检测细胞收缩力的多孔板是软膜底嵌有荧光微图案的du特微孔板,上面有100,000多个均匀分布的X或+形的具有粘性蛋白质微图案,细胞沉降并附着在其上,嵌入板中的X具有弹性,因此每当细胞收缩时它们就会收缩。 X带有分子标记,可以发出荧光,从而可以成像和量化缩小的形状。
可以成像和定量,因此研究人员可以将X或十字架的变形与单个细胞或成千上万个细胞的一定量的力相关联。该技术还为研究人员提供了查看单个细胞钙反应以及它们与细胞强度之间的关系的能力。
该技术也可以用于药物发现。研究人员可以快速,轻松地测试不同的治疗分子,以了解它们如何影响细胞力以及是否可以纠正任何潜在的力问题。
在具有可控刚度的弹性薄膜中嵌入用户设计的粘合剂和荧光微图案,形成非常密集但均匀的阵列(> 120微米/每平方毫米)。100000个患者来源的单细胞(精雀地从疾病起源的人体组织中获得)du立地定位并粘附在微图案上(每个微图案一个细胞),它们对该微图案施加牵引力并明显改变其形状,从而能够在ji高的吞吐量下对细胞收缩性进行直观的基于图像的评估。
1)荧光弹性可收缩表面的微图案化
—在具有可控刚度的弹性薄膜中嵌入用户设计的粘合剂和荧光微图案,形成非常密集但均匀的阵列(> 120微米/每平方毫米)。100000个患者来源的单细胞(精雀地从疾病起源的人体组织中获得)du立地定位并粘附在微图案上(每个微图案一个细胞),它们对该微图案施加牵引力并明显改变其形状,从而能够在ji高的吞吐量下对细胞收缩性进行直观的基于图像的评估。
2)基于图像的受控单细胞收缩性的动力学可视化
—例如,384孔板内的每个附着细胞的微图案在延长的时间内以精细的时间分辨率被du立监控,以直接观察收缩行为的quan步范围,从紧张性收缩到诱导性收缩或松弛,以及任一效应的作用窗口。选择“x”形微图案以小化细胞-基底接触面积,同时大化细胞扩散面积,从而在不同位置产生放大和集中的力。由于每个微图案都与其他微图案机械分离,粘附的细胞不会将应变传递给相邻的微图案,从而确保对群体中每个单个细胞的收缩力进行可靠的评估。
3)单细胞收缩性的自动化和直观的图像分析
—基于该方法的检测产生直观、明确的收缩信号——提供直接的图像分析,以从成像群体中的每个单细胞获得定量和可靠的数据。
可以同时获取1000多个均匀图案的单细胞的强大的收缩性数据,并与96-和384孔板格式wu缝地集成,以促进大规模的药物筛选
图4:细胞牵引力显微镜
图5:细胞微柱阵列,可定制刚度、大小、形状和间距。
细胞微柱阵列介绍
特点:
将细胞培养在具有形貌特征,微柱且具有特定刚度的基质上。 可以以高密度分布微柱以创建细胞施加的力的图(牵引力显微镜),或者它们的大小和排列可以具有细胞大小,因此可用于测量单个细胞的整体收缩力。
●PDMS微柱的偏转可实现力感测
●PDMS微柱的刚度由其尺寸(Durotaxis)控制
●提供几种微柱几何形状和布置
●单细胞力作图(牵引力显微镜)
●可控的生物功能化
●适应任何细胞培养底物(从培养皿到96孔板)
●与高分辨率光学显微镜系统兼容
典型应用:
>单心肌细胞收缩力测定:定量单心肌细胞的搏动力
>牵引力测定:定量细胞在基质上施加的力
力感测,带有基质刚度控制(旋转轴)的迁移分析,牵引力显微镜等。
可订购的产品
1、圆形PDMS微柱10 mm盖玻片:
标准尺寸:24 mm圆形盖玻片(约170μm厚度)
设计:直径为5 um; 中心到中心的距离为7 um
三种高度可供选择:2 um,6 um和12 um
2、带状柱子的盖玻片:
在相同的盖玻片上,有两个大小不一的微柱状带状分布(厚度为1毫米)
设计带1:直径为4 um; 中心到中心的距离为8 um
设计带2:直径为2 um; 中心到中心的距离为4 um
两种高度可供选择:2 um和6 um
3、方形微柱盖玻片
设计:直径7.5um; 微柱之间的距离为20um
三种高度可供选择:2um,6um和12um
4、可定制的直径、高度、间距
我们提供带有微型PDMS微柱的10毫米盖玻片,用于细胞培养和力评估。
不同的支柱设计和布置适合各种应用,例如牵引力显微镜,收缩力和旋转轴。
通过测量PDMS微柱响应于细胞施加的力的挠度来进行力评估。
>随时可用
直接接种细胞
>多种设计可供选择
可用高密度和低密度微柱以及不同纵横比的基板。
>兼容高分辨率显微镜。
易于观察细胞及其对微柱变形的影响
三、高通量细胞收缩力筛选平台
该平台通过将 TFM （牵引力显微镜）从专门的工作台技术转化为一种称为收缩力筛选 (CFS) 的可访问的高通量平台，为客户提供 CFS 所需的四个关键可定制元素:
1、刚度的生理范围
我们开发了聚二甲基硅氧烷 (PDMS) 橡胶的配方,该配方具有柔顺性和机械可调性,可产生约 1 kPa 至 100 kPa 的杨氏弹性模量,使其完Quan处于生理和病理组织刚度范围内。
2、受托荧光珠
我们合成荧光纳米颗粒珠并将它们涂在基底表面以可视化细胞基底变形。wu论您的实验中使用何种荧光标记,我们都可以合成整个光谱的珠子以满足您的成像需求。
3、蛋白质涂层
根据您的细胞要求用定制的粘附蛋白包被我们的软基质来概括粘附生物化学,使细胞能够附着、扩散并在我们的专利软基质上产生力。
4、软件
zui后,我们提供分析软件,让您可以从细胞图像中提取关键的收缩力指标。我们的软件根据您选择的维度(例如试剂浓度、处理持续时间或细胞表型)动态生成和导出这些指标的数据可视化,以便您可以简洁地总结您的见解。
通过将这些打包成多孔格式,我们将 CFS 的强大功能交到用户手中,以便在单个实验中探索影响细胞力的多种条件。访问我们的应用页面,了解 CFS 如何应用于许多学术研究。
收缩力筛选:牵引图视图
