产品名称:Kima 泵 用于剪切流实验的内皮细胞单层细胞培养
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Cellix 的 Kima 泵:用于剪切流实验的内皮细胞单层细胞培养介绍

世联博研(北京)科技有限公司的陈工整理了本文章

Cellix 的 Kima 泵

用于剪切流实验的内皮细胞单层细胞培养。

介绍

Kima 泵是一款微流体泵,旨在帮助在各种生物芯片和流动室中进行细胞培养(例如内皮细胞),包括Cellix 的 Vena8 Endothelial+生物芯片,可以在24-48 小时内同时培养 8 个单层细胞。 如果需要,细胞培养可以持续长达数周。Kima 泵由iPod touch 上的iKima 应用程序控制Kima泵放置在标准培养箱内,而 iPod Touch 作为其控制器则位于培养箱外。Kima 泵通过完耐高压灭菌的管道轻松连接到 Cellix 的 Vena8 Endothelial+ 生物芯片和其他制造商的流动室,并将新鲜培养基脉冲输送到接种在生物芯片微通道内的细胞。iKima 应用程序可从 Apple 的 iTunes 商店下载。

特点和优点:

  • 流动细胞培养:在流动室中简单培养单层内皮细胞,并在 Cellix 的 Vena8 Endothelial+ 生物芯片中于 24-48 小时内培养 8 个单层细胞。
  • 流速: ~250 - 600 ?L/min。如果使用带有 Vena8 生物芯片系列的 Kima 泵,分流器将导致生物芯片 8 个通道中每个通道的流速约为 30 - 75 ?L/min。
  • 再循环培养基:节省试剂且无需额外的流体阀。
  • 培养箱安:无需额外的温度或湿度控制。
  • 脉冲:对培养的细胞单层施加连续或周期性的新鲜培养基脉冲。
  • 可编程:使用 iPod Touch。
  • 易于使用:使用同一控制器和 iPod Touch 控制多 4 个泵。

应用:

  • 用于剪切流实验的内皮细胞单层细胞培养。
  • 使用 Cellix 的 Mirus Evo 或 ExiGo 泵对单层内皮细胞进行细胞间粘附剪切流测定,用于以下研究:
  1. 1 心血管/动脉粥样硬化: 原代单核细胞粘附于冠状动脉内皮细胞。
  2. 2 炎症: THP-1 单核细胞在流动下粘附到 HUVEC。
  3. 3 哮喘/慢性阻塞性肺病:嗜酸性粒细胞对人肺微血管内皮细胞 (HMVEC-L) 的粘附研究。
  4. 4 肿瘤学 - 乳腺癌: MDA 细胞粘附在 TNF-α 上,在剪切流下刺激 HUVEC。

Kima 泵灌注方案:在 Vena8 Endothelial+ 生物芯片中进行涂层和细胞接种,并使用 Kima 泵进行灌注

注:Kima 泵仅用于交换培养基以供给细胞(即液体脉冲/脉动流),而不是连续流。

步骤1:

Cellix 的 Vena8 Endothelial+生物芯片使用标准移液器吸头进行涂层。将约 12 μL 蛋白质(例如纤连蛋白)分配到每个微通道中。注意入口和出口处的过量液体。

2步:

然后将Vena8 Endothelial+生物芯片放入加湿的无菌培养皿中,并置于 4°C 下过夜包被。

步骤3:

(a)孵育期结束后,添加 5 μL 1.5 x 106 /100 μL (? 15 x 106/mL)

内皮细胞轻轻地进入每个通道。*注:指定浓度适用于原代 HUVEC。

(b)将生物芯片保存在无菌培养皿和 CO2 培养箱中 15-20 分钟。在显微镜下观察生物芯片,并用 50 μL 介质填充所有储液器。将生物芯片在 CO2 培养箱中放置 1.5-2 小时。

步骤4:

用 70% 乙醇清洗Kima泵,然后在生物安罩中使用 5 mL 无菌注射器用无菌介质清洗。

5步:

将管道从介质瓶连接到泵的入口端口。将泵的出口端口(带销钉的 8 路电缆)连接到无菌培养皿。使用 iKima 应用程序和介质清洗泵 3 分钟。

6步:

(a)从培养箱中取出生物芯片并放入生物安罩中。在连接到生物芯片之前,使用 iKima 应用程序开始灌注 - 通常灌注 2 分钟,然后暂停 15-20 分钟。当引脚处形成介质液滴时,轻轻地将 8 路电缆连接到生物芯片,以避免气泡。

(b)将出口引脚连接到生物芯片,该生物芯片连接到废弃瓶或相同的介质瓶,以实现相同介质的再循环。这是在生物安罩中完成的。连接后,将 Kima 平台转移到 CO2 培养箱。

注意:所有管道和瓶子必须在实验前进行高压灭菌。